-
1 полимеразная цепная реакция с горячего старта
[греч. polymeres — состоящий из многих частей, многообразный; лат. re- — приставка, обозначающая повторность действия, и actio — действие]вариант полимеразной цепной реакции (см. полимеразная цепная реакция), при котором создаются специальные условия для предотвращения неспецифической амплификации фрагментов ДНК до создания оптимальной температуры реакционной смеси. В одном из вариантов метода для этой цели первоначально ДНК-полимеразу и реакционную смесь разделяют легкоплавким физическим барьером (напр., воском); при нагревании пробирки переход ДНК-полимеразы в реакционную смесь происходит при температуре около 55 °С.Толковый биотехнологический словарь. Русско-английский. > полимеразная цепная реакция с горячего старта
-
2 полимеразная цепная реакция с горячего старта
[греч. polymeres — состоящий из многих частей, многообразный; лат. re- — приставка, обозначающая повторность действия, и actio — действие]вариант полимеразной цепной реакции (см. полимеразная цепная реакция), при котором создаются специальные условия для предотвращения неспецифической амплификации фрагментов ДНК до создания оптимальной температуры реакционной смеси. В одном из вариантов метода для этой цели первоначально ДНК-полимеразу и реакционную смесь разделяют легкоплавким физическим барьером (напр., воском); при нагревании пробирки переход ДНК-полимеразы в реакционную смесь происходит при температуре около 55 °С.Толковый биотехнологический словарь. Русско-английский. > полимеразная цепная реакция с горячего старта
-
3 ввод воздуха
Forestry: air entrainment (в реакционную смесь) -
4 гнездовая полимеразная цепная реакция
= гнездовая ПЦР[греч. polymeres — состоящий из многих частей, многообразный; лат. re- — приставка, обозначающая повторность действия, и actio — действие]вариант полимеразной цепной реакции (см. полимеразная цепная реакция) с использованием двух пар праймеров (внешних и внутренних), одна из которых способна амплифицировать внутренний участок ампликона, полученного после первого раунда амплификации с внешней парой праймеров. Существует несколько вариантов применения Г.п.ц.р. в лабораторной диагностике; напр., в одном из вариантов проводится амплификация (15—30 циклов) с внешней парой праймеров, при этом амплифицируется основной фрагмент ДНК. Далее часть содержимого переносится в новую пробирку, содержащую реакционную смесь, в состав которой входит пара праймеров, узнающая последовательности, лежащие внутри основного ампликона. Второй раунд амплификации (реамплификации) также составляет 15—30 циклов. В другом варианте температура отжига внутренней пары праймеров подбирается с таким расчетом, чтобы при проведении первого раунда амплификации они не участвовали в реакции. Обычно температура отжига праймеров в этом варианте Г.п.ц.р. подбирается на 10—15 °С ниже, чем для внешней пары праймеров; программа амплификации в этом случае состоит из двух программных блоков. После проведения первого программного блока амплификации температура отжига праймеров для второго раунда задается на 10 градусов ниже, что обеспечивает эффективное участие внутренней пары праймеров во втором раунде амплификации. По сравнению со стандартной полимеразной цепной реакцией Г.п.ц.р. имеет более высокую чувствительность и специфичность.Толковый биотехнологический словарь. Русско-английский. > гнездовая полимеразная цепная реакция
-
5 метод обрыва цепи
[греч. methodos — способ познания]метод, применяемый при определении нуклеотидной последовательности ДНК (см. секвенирование ДНК), который основан на полимеразной цепной реакции (см. полимеразная цепная реакция). В качестве матрицы в этой реакции используется одноцепочечная ДНК, нуклеотидную последовательность которой надо определить. Первоначально матрицу гибридизуют с коротким праймером, связывающимся с ее 3'-концом. Затем в реакционную смесь добавляют четыре дезоксирибонуклеозидтрифосфата (дНТФ) и один из четырех дидезоксирибонуклеозидтрифосфатов (ддНТФ). Остановка синтеза новой цепи ДНК-полимеразой (обрыв цепи) будет происходить всякий раз, когда вместо дНТФ в растущую цепь ДНК будет встраиваться соответствующий ему ддНТФ. Для определения последовательности нуклеотидов необходимо осуществить четыре отдельные реакции в присутствии каждого из четырех ддНТФ. Затем четыре пробы вносят в соседние лунки пластины геля и проводят гель-электрофорез, в котором длина пробега каждого компонента обратно пропорциональна длине цепи. Как только фрагменты ДНК визуализированы, нуклеотидную последовательность можно прочесть прямо в геле снизу по направлению к старту в соответствии с очередностью, в которой фрагменты располагаются на отдельных "дорожках". М.о.ц. предложен Ф. Сенгером в 1975 г. (Нобелевская премия за 1980 г. совместно с У. Гилбертом и П. Бергом).Толковый биотехнологический словарь. Русско-английский. > метод обрыва цепи
-
6 полимеразная цепная реакция в режиме реального времени
= количественная полимеразная цепная реакция[греч. polymeres — состоящий из многих частей, многообразный; лат. re- — приставка, обозначающая повторность действия, и actio — действие]вариант полимеразной цепной реакции (см. полимеразная цепная реакция), при котором непрерывно регистрируется кинетика реакции, что позволяет количественно оценивать содержание определенных нуклеотидных последовательностей ДНК в сложной смеси молекул. Первый вариант этого метода был предложен П. Холландом с соавт. в 1991 г. (метод "TaqMan"). Согласно протоколу в реакционную смесь кроме обычных двух праймеров добавляют олигонуклеотидный зонд, меченный по 5'-концу флюорофором (см. флуорохром) и содержащий в своей центральной или 3'-части глушитель флуоресценции, который отжигается в каждом цикле реакции с центральным участком ампликона (Ампликон (2)) между двумя амплифицирующими его праймерами. Сам зонд не используется в качестве праймера, поскольку 3'-концевая гидроксильная группа блокирована ортофосфатом. В ходе реакции термостабильная Taq-полимераза вытесняет зонд из дуплекса, а затем за счет своей 5'→3'-экзонуклеазной активности отщепляет его 5'-концевой нуклеотид, меченный флуорофором. Чем выше концентрация амплифицируемой нуклеотидной последовательности в реакционной смеси, тем меньше требуется количество циклов для того, чтобы интенсивность флуоресценции освободившегося флуорофора в пробе превысила базальный уровень свободного зонда с глушителем. С этого момента (порог числа циклов) появляется возможность наблюдать за кинетикой реального накопления флуорофора в реакционной смеси.Толковый биотехнологический словарь. Русско-английский. > полимеразная цепная реакция в режиме реального времени
См. также в других словарях:
АЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ — А. МОНОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ 1. С1 : металлоорганические соединения. Эти соединения обычно получают двумя методами: а) действием активного металла (Na, Li, Mg, Zn) на органический галогенид, например: или б) действием галогенида менее… … Энциклопедия Кольера
Метамфетамин — Метамфетамин … Википедия
Полимер — (Polymer) Определение полимера, виды полимеризации, синтетические полимеры Информация об определении полимера, виды полимеризации, синтетические полимеры Содержание Содержание Определение Историческая справка Наука о Полимеризация Виды… … Энциклопедия инвестора
КАТАЛИЗ — ускорение химических реакций под действием малых количеств веществ (катализаторов), которые сами в ходе реакции не изменяются. Каталитические процессы играют огромную роль в нашей жизни. Биологические катализаторы, называемые ферментами,… … Энциклопедия Кольера
Химические свойства спиртов — Химические свойства спиртов это химические реакции спиртов во взаимодействии с другими веществами. Они определяются в основном наличием гидроксильной группы и строением углеводородной цепи, а также их взаимным влиянием: Чем больше… … Википедия
Алмаз — минерал, кристаллическая модификация чистого углерода (С). А. обладает самой большой из всех известных в природе материалов твёрдостью, благодаря которой он применяется во многих важных отраслях промышленности. Известны три… … Большая советская энциклопедия
ВИЛЬЯМСОНА СИНТЕЗ — получение простых эфиров (обычно несимметричных) алкилированием алкоголятов или фенолятов алкилгалогенидами: Для синтеза алифатич. эфиров смесь алкоголята с R Hal кипятят без р рителя или в р рителе, индифферентном к реагентам (напр., в эфире,… … Химическая энциклопедия
Хлороформ — Хлороформ … Википедия
Полимеразная цепная реакция — (ПЦР) экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Помимо амплификации ДНК, ПЦР… … Википедия
ХИМИЧЕСКАЯ КИНЕТИКА И ХИМИЧЕСКОЕ РАВНОВЕСИЕ — Скорость любой химической реакции зависит от условий, в которых она протекает: от концентрации реагентов (или их давления, если это газы), температуры, наличия катализатора или излучения и т.д. Одни реакции протекают практически мгновенно… … Энциклопедия Кольера
Метод Сэнгера — «Секвенирующая лестница», радиоавтограф геля Метод Сэнгера метод секвенирования (определения последовательности нуклеотидов) ДНК, также известен как метод обрыва цепи. Впервые этот метод секвенирования был предложен Фредериком Сэнгером в 1977… … Википедия
